सूक्ष्म जीवों-छोटे, ज्यादातर एक कोशिकीय जीव हैं, जो बड़े पैमाने पर प्रकृति में है । वे कर रहे हैं में पाया सभी प्रकार के वातावरण (हवा, मिट्टी, पानी), में मनुष्यों और पशुओं, पौधों में.
उच्च गुणवत्ता वाले विविधता और सूक्ष्मजीवों की संख्या पर मुख्य रूप से निर्भर पोषण यौगिकों. हालांकि, समान रूप से महत्वपूर्ण हैं तापमान, नमी, वेंटिलेशन, सूरज की रोशनी, और अन्य कारकों.
के तरीकों, स्वच्छता, सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान प्राकृतिक वातावरण प्रकट रोगाणुओं की उपस्थिति निर्धारित करने के लिए, उनकी संख्या और के अनुसार, परिणाम प्राप्त किया, विकसित करने के लिए उपायों के उन्मूलन के लिए या रोकथाम के संक्रामक रोगों । इसके अलावा, मात्रात्मक रिकॉर्ड करने के लिए आवश्यक हैं मॉडल पारिस्थितिक तंत्र और विकास के प्रबंधन के सिद्धांतों के प्राकृतिक प्रक्रियाओं. पर विचार अगले क्या कर रहे हैं, तरीकों में सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान.
यह माना जाता है के रूप में वैज्ञानिकों द्वारा संभव तरीकों में से एक के संचरण के संक्रामक विकृतियों । के साथ स्राव के बीमार लोगों या जानवरों को मिट्टी में घुसना रोगजनक सूक्ष्मजीवों. उनमें से कुछ, विशेष रूप से बीजाणु कर सकते हैं, जो जीवित रहने के लिए मिट्टी में एक लंबे समय (कभी कभी कई दशकों के लिए). मिट्टी में कर रहे हैं की activators इस तरह के खतरनाक संक्रमण, इस तरह के रूप में टिटनेस, एंथ्रेक्स, बोटुलिज़्म, आदि. के तरीकों, स्वच्छता, सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान की मिट्टी आप की अनुमति को परिभाषित करने के लिए "माइक्रोबियल गिनती" (सूक्ष्मजीवों की संख्या प्रति ग्राम की मिट्टी), और कोलाई-सूचकांक की संख्या (ई. कोलाई).
तरीकों में सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन के लिए मिट्टी पहले करना चाहिए में शामिल हैं, प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी और टीका के घने पोषक तत्व माध्यम है । आबादी के सूक्ष्मजीवों और उनके समूहों inhabiting मिट्टी, और विभिन्न वर्गीकरण की स्थिति और पारिस्थितिकी कार्य करता है । विज्ञान के क्षेत्र में वे राज्य के तहत सामान्य शब्द "मिट्टी बायोटा". मिट्टी-वास की एक विशाल संख्या के लिए सूक्ष्मजीवों. में एक ग्राम मिट्टी में मौजूद है, से 1 करने के लिए 10 अरब डॉलर की अपनी कोशिकाओं. इस माहौल में, सक्रिय रूप से आय के कार्बनिक पदार्थों के अपघटन की भागीदारी के साथ विविध saprophytic सूक्ष्मजीवों.
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विश्लेषण पर्यावरण के नमूने के साथ शुरू होता है. ऐसा करने के लिए, प्री-साफ और शराब के साथ मला चाकू (आप कर सकते हैं एक फावड़ा का उपयोग करें). यह द्वारा पीछा किया जाता है नमूना तैयारी है । अगले चरण – गिनती कोशिकाओं पर दाग स्मीयरों. विचार प्रत्येक चरण में अलग है.
के विश्लेषण के कृषि मिट्टी, एक नियम के रूप में, नमूने ले रहे हैं की गहराई से पूरी परत है । सबसे पहले, निकालें, शीर्ष 2-3 सेमी की मिट्टी, के रूप में यह शामिल हो सकता है बाहरी microflora. उसके बाद, अध्ययन के क्षेत्र लेने के मिट्टी monoliths. लंबाई उनमें से प्रत्येक के अनुरूप होना चाहिए करने के लिए परत की मोटाई से जो नमूना करने के लिए.
के एक भूखंड पर 100-200 वर्ग मीटर. एम चयनित नमूने 7-10. के वजन के प्रत्येक के आदेश के 0.5 किलो । नमूना होना चाहिए, अच्छी तरह से मिश्रित बैग में. तो ले एक औसत नमूना, वजन लगभग 1 किलो है । यह में रखा जाना चाहिए चर्मपत्र (बाँझ) पैकेज में एम्बेडेड, एक कपड़े के बैग में । विश्लेषण करने से पहले नमूना फ्रिज में रखा जाता है.
मिश्रित मिट्टी डाल दिया है और एक सूखी ग्लास. पहले यह किया जाना चाहिए शराब के साथ साफ हो और जला बर्नर से ऊपर है । रंग के साथ मिट्टी को अच्छी तरह से मिश्रित है और में विघटित एक भी परत. यह अनिवार्य है के लिए जड़ों को हटाने, और अन्य बाहरी तत्वों. ऐसा करने के लिए, चिमटी का प्रयोग करें. काम करने से पहले चिमटी की एक जोड़ी और एक रंग कैलक्लाइंड एक बर्नर और शांत है ।
से एक प्रकार की मिट्टी पर वितरित ग्लास, चयनित छोटे भागों । वे वजन में एक चीनी मिट्टी के बरतन कप पर एक तकनीकी स्केल. एक अनिवार्य कदम में सूक्ष्म विधि सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन एक विशेष उपचार का नमूना है । यह आवश्यक है तैयार करने के लिए 2 बाँझ बोतल दिए. अपनी क्षमता से अधिक नहीं होगी 250 मिलीलीटर । में एक बोतल डालना, 100 मिलीलीटर के नल का पानी. इसे से हम ले 0.4-0.8 मिलीलीटर के तरल और मिट्टी को गीला करने के लिए निलंबन के लिए एक पेस्ट. मिश्रण के साथ मला जाना चाहिए, अपनी उंगली या एक रबर पैर के लिए 5 मिनट है.
पानी से पहली फ्लास्क बड़े पैमाने पर मिट्टी स्थानांतरित करने के लिए खाली कुप्पी. इसके अलावा, यह फिर से मला । बाद में इस मास में स्थानांतरित कर रहा है फ्लास्क के पास लौ । क्षमता के साथ एक मिट्टी के निलंबन हिल रहा है एक घुमाव पर 5 मिनट के लिए छोड़ दें तो यह समझौता करने के लिए के बारे में 30 एस. यह सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक है कि बड़े कण बसे है. आधे से एक मिनट बाद में, बड़े पैमाने पर इस्तेमाल किया की तैयारी के लिए दवा.
प्रत्यक्ष सूक्ष्म अध्ययन की मिट्टी पर किया जाता है विधि सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन द्वारा विकसित Vinogradsky. एक निश्चित मात्रा के निलंबन की संख्या की गिनती की कोशिकाओं सूक्ष्मजीवों. अध्ययन के फिक्स्ड स्मीयरों की अनुमति देता है आप को बचाने के लिए दवाओं की लंबी अवधि के लिए और गणना करने पर किसी भी समय.
तैयारी के बाहर किया जाता हैनिम्नलिखित तरीके में. एक निश्चित राशि के निलंबन (आम तौर पर 0.02-0.05 एमएल) लागू किया जाता है के साथ एक micropipette एक गिलास स्लाइड पर है । यह करने के लिए एक बूंद को जोड़ने का एक समाधान के agar-agar (पॉलीसैकराइड का एक मिश्रण के agaropectin और agarose से निकाले भूरा और लाल शैवाल के काला सागर), जल्दी मिश्रण और वितरण के क्षेत्र पर 4-6 वर्ग. मुख्यमंत्री धब्बा है हवा में सूखे और तय 20-30 मिनट के लिए. शराब (96 %). इसके अलावा, दवा के साथ सिक्त आसुत पानी में रखा गया है, एक आर-आर पांगविक erythrosine के लिए 20-30 मिनट के लिए ।
धुंधला के बाद, यह धोया जाता है और हवा में सूख गया । सेल गिनती के साथ किया जाता है विसर्जन उद्देश्य है ।
सूक्ष्म तरीकों में सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान की अनुमति की पहचान करने के लिए सूक्ष्मजीवों की एक बड़ी संख्या है । लेकिन इस के बावजूद, इस विधि से बुवाई माना जाता है में सबसे आम अभ्यास है । यह होते हैं बुवाई में दवा की मात्रा (मिट्टी निलंबन) में एक पेट्री डिश में घने मध्यम.
विधि सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन की अनुमति देता है पर विचार करने के लिए न केवल मात्रा लेकिन यह भी समूह में, और कुछ मामलों में प्रजातियों की संरचना सूक्ष्म वनस्पति. की संख्या की गिनती कालोनियों का उत्पादन किया, एक नियम के रूप में, के नीचे से पेट्री डिश में प्रेषित प्रकाश. गिना भूखंड पर एक डॉट एक मार्कर के साथ या स्याही के साथ.
Microflora के एक पानी के शरीर, आम तौर पर दर्शाता है के माइक्रोबियल संरचना के चारों ओर मिट्टी. इस संबंध में, के तरीकों, स्वच्छता, सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान के पानी और मिट्टी एक विशेष व्यावहारिक महत्व के अध्ययन में इस शर्त के विशिष्ट पारिस्थितिकी प्रणालियों. ताजा पानी में आम तौर पर कर रहे हैं cocci, छड़ के आकार का जीवाणु है.
Anaerobic बैक्टीरिया पानी में कम मात्रा में पाया. आमतौर पर, वे पुन: पेश नीचे के तालाबों, कीचड़ में, में भाग लेने प्रक्रियाओं की शुद्धि है । Microflora के महासागरों और समुद्र का प्रतिनिधित्व मुख्य रूप से नमक (halophilic) बैक्टीरिया.
के पानी में artesian कुओं के सूक्ष्म जीवों कर रहे हैं लगभग वहाँ है. इस कारण के लिए निस्पंदन क्षमता की मिट्टी.
आम के तरीकों के सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा के पानी माना जाता है होना करने के लिए दृढ़ संकल्प के माइक्रोबियल संख्या और कोलाई-शीर्षक या कोलाई-सूचकांक । पहली सूचक का वर्णन करता है बैक्टीरिया की संख्या के 1 मिलीलीटर में तरल. अगर सूचकांक का प्रतिनिधित्व करता है की संख्या, ई. कोलाई में मौजूद पानी की एक लीटर, और अगर शीर्षक है – न्यूनतम संख्या या अधिकतम कमजोर पड़ने के तरल पदार्थ में जो वे कर सकते हैं अभी भी पाया जा सकता है.
इस विधि स्वच्छता-सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान के पानी में होते हैं निम्नलिखित हैं. 1 मिलीलीटर में पानी की निर्धारित संख्या के ऐच्छिक anaerobes और mesophilic (इंटरमीडिएट), एरोबिक, करने के लिए सक्षम mesopatamia अग्रवाल (बुनियादी मध्यम) में 37 डिग्री. दिन के दौरान करने के लिए फार्म कालोनियों दिखाई दे रहे हैं कि के साथ बढ़ाई 2-5 पी. या नग्न आंखों के लिए है ।
कुंजी का मंच माना जाता है विधि सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा के पानी बोने. प्रत्येक नमूने की है सीडिंग नहीं कम से कम 2 अलग अलग संस्करणों. के विश्लेषण में नल के पानी में एक कप बनाने के लिए एक 1-0 की बढ़त है । के 1 मिलीलीटर शुद्ध तरल और 0.01-0.001 ml दूषित है । बुवाई के लिए 0.1 मिलीलीटर या छोटे तरल पदार्थ की मात्रा के साथ पतला है आसुत (बाँझ) पानी है । लगातार तैयार दस गुना dilutions. 1 मिलीलीटर से प्रत्येक के लिए उन्हें लाने में दो पेट्री डिश.
कमजोर पड़ने डाला पोषक तत्व agar. यह होना चाहिए पूर्व पिघला और शांत करने के लिए 45 डिग्री है । के बाद एक सक्रिय मिश्रण पर्यावरण पर छोड़ दो एक स्तर की सतह के solidification के लिए. पर 37 डिग्री. उगाई जाने वाली फसलों दिन के दौरान. पर विचार करें विधि सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा के पानी की अनुमति देता है आप करने के लिए परिणामों को पोस्ट पर उन कप, जहां कॉलोनियों की संख्या में 30 से लेकर 300 के लिए.
यह है एक पारगमन मध्यम के लिए सूक्ष्मजीवों. मुख्य तरीकों सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन के एयर कर रहे हैं अवसादन (बसने) और आकांक्षा है.
Microflora की हवा वातावरण है पारंपरिक में विभाजित चर और निरंतर. पहली है खमीर, वर्णक-cocci, बीजाणु असर बेसिली, कोलाई और अन्य सूक्ष्मजीवों है कि प्रतिरोधी रहे हैं, सुखाने के लिए प्रकाश के लिए जोखिम. के प्रतिनिधियों चर microflora मर्मज्ञ से हवा को एक परिचित वातावरण, लंबे समय बनाए रखने के लिए उनकी व्यवहार्यता.
में हवा के बड़े शहरों में सूक्ष्मजीवों तुलना में बहुत अधिक है, हवा में ग्रामीण इलाकों के हैं । पर समुद्र और जंगलों के बैक्टीरिया बहुत छोटा है । शुद्ध हवा के लिए योगदान देता है वर्षा: बर्फ और बारिश. बंद रिक्त स्थान में कीटाणुओं का एक बहुत की तुलना में अधिक खुला स्थान है । उनकी संख्या बढ़ जाती है सर्दियों में, जब की कमी के कारण नियमित रूप से वेंटिलेशन.
विधि सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान सूक्ष्म जीव विज्ञान में माना जाता है होना करने के लिए सरल है । यह आधारित है पर बयान की बूंदों और कणों की सतह पर आगर में एक खुला पेट्री डिश गुरुत्वाकर्षण के प्रभाव के तहत. विधि के अवसादन के लिए अनुमति नहीं है सही रूप में निर्धारित संख्या में बैक्टीरिया की हवा है । तथ्य यह है कि को पकड़ने के लिए ठीक भिन्न धूल के कणों और बैक्टीरिया बूँदें काफी मुश्किल है । सतह पर देरी मुख्य रूप से बड़े कणों.
इस विधि नहीं हैइस्तेमाल के विश्लेषण में वायुमंडलीय हवा है । इस वातावरण के द्वारा होती है, बड़ा उतार-चढ़ाव की गति में हवा का प्रवाह. अवसादन, तथापि, इस्तेमाल किया जा सकता है के अभाव में और अधिक परिष्कृत उपकरण या बाहरी शक्ति के स्रोत.
दृढ़ संकल्प के माइक्रोबियल गिनती के द्वारा किया जाता है विधि Omelyanska. के अनुसार उसे, 5 मिनट के लिए सतह पर के के अग्रवाल के एक क्षेत्र के साथ 100 वर्ग सेमी जमा किया जाता है बैक्टीरिया की एक संख्या में मौजूद है, जो 10 एल की हवा.
जीवाणु विश्लेषण में एक महत्वपूर्ण भूमिका है, नैदानिक और प्रयोगशाला गतिविधियों के उद्देश्य से निदान, रोकथाम और विभिन्न संक्रामक रोगों के उपचार. हालांकि, अध्ययन के वातावरण में वे कर रहे हैं तक ही सीमित नहीं है.
का विशेष महत्व है जीवाणु विश्लेषण जैविक सामग्री के अस्पतालों में. किए गए शोध में स्वास्थ्य सुविधाओं, वृद्धि की मांग की है । आदेश के प्रयोजन पर "एकीकरण के सूक्ष्मजीवविज्ञानी अनुसंधान के तरीके" है करने के लिए सुधार के जीवाणु विश्लेषण, गुणवत्ता में सुधार लाने और दक्षता के सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान ।
यह है एक महत्वपूर्ण विश्लेषण विधि के निदान में यौन संचारित संक्रमण, और अवसरवादी संक्रमण (अवसरवादी बैक्टीरिया) है ।
सूक्ष्म विश्लेषण की अनुमति देता है का मूल्यांकन करने के लिए गुणात्मक और मात्रात्मक रचना के microflora, के लिए की सत्यता की जांच के नमूने. उदाहरण के लिए, की उपस्थिति में योनि उपकला में एक धब्बा ले लिया से गर्भाशय ग्रीवा को इंगित करता है के नियमों के उल्लंघन के संग्रह का एक जैविक नमूना है ।
यह कह रही लायक है कि सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षा में इस मामले में आम तौर पर है के साथ कुछ समस्याओं. वे कर रहे हैं के साथ जुड़ा हुआ है कि इस तथ्य में कम जननांग पथ के सामान्य microflora मौजूद विविध, अलग अलग उम्र. दक्षता में सुधार करने के लिए अनुसंधान और विकास के एक समान नियम हैं.
यह तरीकों की पहचान करने के आरएनए और डीएनए रोगज़नक़ों. वे कर रहे हैं के आधार पर मुख्य रूप से दृढ़ संकल्प के nucleotide दृश्यों में रोग की सामग्री है । इस प्रयोजन के लिए, आणविक जांच की । वे प्रतिनिधित्व करते हैं एक कृत्रिम रूप से उत्पादित न्यूक्लिक एसिड के पूरक (पूरक करने के लिए) वायरल एसिड के साथ चिह्नित रेडियोधर्मी लेबल या बायोटिन.
ख़ासियत की विधि है, कई नकल के एक विशिष्ट डीएनए टुकड़ा भी शामिल है कि एक कुछ सौ या (दर्जन) nucleotide जोड़े । प्रतिकृति (नकल) है कि ऊपर का निर्माण शुरू कर सकते हैं केवल कुछ ब्लॉक है. बनाने के लिए उन्हें का उपयोग प्राइमरों (शुरुआत). वे प्रतिनिधित्व करते हैं संश्लेषित oligonucleotides.
पीसीआर निदान (पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन) लागू करने के लिए सरल है । इस विधि की अनुमति देता करने के लिए जल्दी से परिणाम प्राप्त का उपयोग कर एक छोटी राशि के रोग की सामग्री है । का उपयोग पीसीआर निदान का पता चला तीव्र, पुरानी और अव्यक्त (छुपा) संक्रमण.
संवेदनशीलता की इस विधि अधिक पसंद है । हालांकि, वर्तमान में परीक्षण प्रणाली, पर्याप्त विश्वसनीय नहीं है, तो पीसीआर निदान नहीं कर सकते पूरी तरह से बदलने के पारंपरिक तरीकों ।
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Alin Trodden - लेख के लेखक, संपादक
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