Los Microorganismos – el más pequeño, principalmente unicelulares seres, ampliamente difundidos en la naturaleza. Ellos se detectan en todos los medios (aire, suelo, agua), en los seres humanos y animales, en las plantas.
De Calidad, la variedad y la cantidad de los microorganismos depende en primer lugar de nutrientes. Sin embargo, la importancia que tienen también la humedad, la temperatura, la aireación, la acción de la luz solar y otros factores.
Métodos de higiene microbiológica de la investigación ambientes naturales permiten detectar la presencia de microorganismos patógenos, determinar su número y, de acuerdo con los resultados obtenidos, formular medidas de solución o prevención de enfermedades infecciosas. Además, el recuento cuantitativo es necesario para la modelización de ecosistemas y desarrollo de los principios de la gestión de los procesos naturales. Considere la siguiente, ¿qué son Métodos microbiológicos de la investigación.
Es considerado por los científicos como una de las posibles vías de transmisión de patologías infecciosas. Con secreciones de personas enfermas o de los animales en el suelo penetran microorganismos patógenos. Algunos de ellos, en particular, споровые, son capaces de persistir en el suelo mucho tiempo (a veces varias decenas de años). En el suelo caen causantes de estas infecciones peligrosas, como el ántrax, botulismo, etc. Métodos de higiene microbiológica de estudios de suelos permite definir a los "gérmenes de número (número de microorganismos en un gramo de suelo), así como pica-código postal (número intestinales palos).
Los métodos microbiológicos estudios de suelos, en primer lugar, atribuir directa микроскопирование y la siembra en el denso caldo de cultivo. La población de microorganismos y su grupo, que pueblan la tierra, se diferencian por la posición taxonómica y ambientales de las funciones. En la ciencia se agrupan bajo el término "почвенная biota". El terreno – el hábitat de una enorme cantidad de microorganismos. En un gramo de suelo presente, de 1 a 10 mil millones de sus células. En este entorno activamente pasa descomposición de la materia orgánica, con la participación de una variedad de estos microorganismos.
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El Análisis de su entorno comienza con la selección de las muestras. Para ello, utilizan previamente peladas y frotado con alcohol y un cuchillo se puede usar la pala). Después de esto se realiza la preparación de la muestra. El siguiente paso – el recuento de las células en el frotis teñido. Echemos un vistazo a cada etapa por separado.
En el análisis de cultivable del suelo, como regla general, las muestras toman con la profundidad de la capa. Primero se elimina de 2-3 cm en la parte superior del suelo, ya que puede estar presente superflua la microflora. Después de ello, la zona estudiada del suelo toman monolitos. La longitud de cada uno de ellos debe coincidir con el espesor de la capa, de la que desea muestrear.
En un tramo de 100 a 200 metros cuadrados, se recoge 7-10 de las muestras. El peso de cada – del orden de 0,5 kg de Muestras es necesario mezclar bien en un bolso. Después de esto toman el promedio de la muestra, con un peso de aproximadamente 1 kg de debe colocar en пергаментный (estéril) paquete incluido en una bolsa de tela. Antes de realizar el análisis directo de la muestra se almacena en el refrigerador.
Перемешанная el suelo se echan en seco de vidrio. Previamente se debe frotar con alcohol y quemar sobre el hornillo. Con la ayuda de la espátula, el suelo se mezcla cuidadosamente y se extiende por la capa igual. Obligatoriamente debe eliminar los lomos, otros elementos extraños. Para ello, se utiliza un par de pinzas. Antes de trabajar un par de pinzas y una espátula recalientan sobre el hornillo y enfrían.
De las distintas zonas del suelo, distribuida por el cristal, se seleccionan en pequeñas porciones. Sus pesa en la porcelana de la taza de los pesos. Paso obligatorio microscópico El método microbiológico de la investigación Es el tratamiento especial de la muestra. De antemano debe preparar 2 estériles de la bombilla. Su capacidad no debe exceder de 250 ml En uno de los matraces se vierten 100 ml de agua del grifo. De ella se toman 0.4-0.8 ml de líquido y humedecen навеску el suelo hasta el estado pastoso. La mezcla debe frotar el dedo de goma o con la mano de mortero dentro de los 5 minutos
El Agua de la primera bombilla почвенную masa llevan en la vacía en el frasco. Siguiente de nuevo trituran. Después de esto, el peso se transfiere a un frasco cerca de la llama del quemador. La capacidad de una suspensión de suelo se agitan en el balanceo en el transcurso de 5 minutos Después de eso, se dejan reposar unos 30 segundos Es necesario para que las partículas grandes se establecieron. A través de la masa de medio minuto utilizan para la preparación de la droga.
Directa микроскопическое el estudio del terreno se realiza por El método microbiológico de la investigación diseñado Виноградским. En cierto volumen de preparada la suspensión se calcula el número de células de los microorganismos. El estudio de los fijos de los frotis permite guardar los medicamentos en el largo plazo y realizar los cálculos en cualquier momento.
La Preparación de un medicamento sede la siguiente manera. Un cierto volumen de la suspensión (como regla general, 0.02-0.05 ml) se aplica con una micropipetas en un portaobjetos de vidrio. Le añade una gota de solución de agar-agar (una mezcla de polisacáridos агаропектина y агарозы extraídas de la pardas y algas rojas del mar Negro), rápidamente se mezclan y se distribuyen en la plaza de 4-6 metros cuadrados, consulte la Pincelada se seca al aire y se fija 20-30 minutos en alcohol (96 %). Siguiente medicamento humedecen con agua destilada, se coloca en r-r карболового эритрозина de entre 20 y 30 minutos
Después de la tinción lo lavan y se secan al aire. El recuento de células se realiza con иммерсионным de la lente.
Microscópicas Métodos microbiológicos de la investigación le permite identificar un gran número de microorganismos. Pero a pesar de esto, el método de siembra es considerada como la más común en la práctica. Su esencia consiste en высеве la cantidad de medicamento (la suspensión) en una placa de petri en el denso ambiente.
Este El método microbiológico de la investigación le permite tener en cuenta no sólo la cantidad, sino también de directiva de grupo y, en algunos casos y la composición de las especies impuso por un solo punto de la flora. El conteo del número de colonias se realiza, como regla general, desde el fondo de la taza de petri, en la microscopía de luz. En подсчитанном tramo se pone el punto de marcador o tinta.
La Microflora de agua de un objeto, como regla general, refleja microbiano de la composición del suelo cerca de él. En este sentido, Métodos de higiene microbiológica de la investigación del agua y del suelo Son de especial importancia práctica al estudiar el estado del ecosistema. En agua dulce se encuentran, generalmente, кокки, una forma de varilla de la bacteria.
Анаэробы en el agua se encuentran en pequeñas cantidades. Como regla general, se reproducen en el fondo de cuerpos de agua, en la ile de la participación en los procesos de purificación. La microflora de los océanos y de los mares se presenta principalmente солелюбивыми (галофильными) de bacterias.
En el agua de pozos artesianos de microorganismos casi no existe. Esto es condicionado por la capacidad de filtración del suelo.
Generalmente aceptados Los métodos microbiológicos de la investigación del agua Se consideran definición microbiana en el número y pica-título o pica-índice. El primer indicador caracteriza la cantidad de bacterias en 1 ml de líquido. Si el índice es el número de los palos, presentes en un litro de agua, y pica-título – el número mínimo o máximo de la cría de líquido, en el que aún se puede descubrir.
Este método de higiene microbiológica de la investigación del agua consiste en lo siguiente. En 1 ml de agua determinan el número de facultativos анаэробов y мезофильных (intermedio) аэробов, capaces de hacer мясопептонном afroamericanos (principal de un medio de cultivo) a 37 grados. a lo largo del día formar colonias visibles cuando se aumenta de 2 a 5 p. o con el ojo desnudo.
La Clave de la etapa en cuestión El método microbiológico de la investigación del agua Es la siembra. De cada muestra se hace la siembra de no menos de 2 diferentes cantidades. En el análisis de agua por cada taza de agua aportan por 1-0.1 ml de un líquido puro y de 0.01-0.001 ml contaminada. Para sembrar 0.1 ml o menor volumen de líquido se divorcia de agua destilada (estéril) de agua. Constantemente se preparan десятикратные de cría. 1 ml de cada uno de ellos aportan en dos tazas de petri.
La Cría se llenan para nutrir la placa de agar selectivo. Su debe derretir y enfriar hasta 45 grados. Después de la mezcla activa miércoles dejan en una superficie horizontal para el curado. A 37 grados. los cultivos se cultivan a lo largo del día. En cuestión El método microbiológico de la investigación del agua le permite tener en cuenta los resultados en las placas de petri, donde el número de colonias se encuentra en el rango de 30 a 300.
Él se considera el tránsito de un medio de microorganismos. Los principales Los métodos microbiológicos de la investigación de aire son sedimentación (asentamiento) y la aspiración.
La Microflora aire convencionalmente se divide en una variable y constante. La primera son la levadura, пигментообразующие кокки, спороносные bacilos de la tuberculosis, palos y otros microorganismos resistentes a la desecación, los efectos de la luz. Los representantes de la variable de la microflora, penetrando en el aire de la habitual para ellos hábitat, poco tiempo conservan su viabilidad.
En el aire de las grandes ciudades de los microorganismos es mucho mayor que en el aire ambiente de las zonas rurales. Sobre los mares, los bosques de bacterias muy poco. Purificación de aire contribuyen a la precipitación: la nieve y la lluvia. En los locales cerrados de microbios mucho más que en espacios abiertos. Su cantidad aumenta en el invierno, junto con la ausencia regular de la ventilación.
Este El método microbiológico para la investigación en microbiología se considera la más simple. Se basa en оседании de gotas y partículas en la superficie del agar en el abierto de una placa de petri bajo la acción de la fuerza de la gravedad. El método de sedimentación no permite determinar con exactitud el número de bacterias en el aire. El hecho de que en la taza de captar los finos de polvo y bacterias de las gotas es bastante difícil. En la superficie se retrasan principalmente las partículas más grandes.
Este método nose utiliza en el análisis del aire de la atmósfera. Este entorno son propias de las grandes fluctuaciones en la velocidad de movimiento de las corrientes de aire. La sedimentación, sin embargo, puede utilizarse en ausencia de mejores instrumentos o de la fuente de energía.
La Definición microbiana de los números se realiza por el método de Омелянского. De acuerdo con ella, en menos de 5 minutos en la superficie del agar con una superficie de 100 metros cuadrados) se asienta cuál es el número de bacterias, que está presente en 10 l de aire.
Bacteriológico análisis ocupa el lugar más importante en el complejo clínico-laboratorio de actividades dirigidas al diagnóstico, prevención y tratamiento de diversas enfermedades infecciosas. Sin embargo, el estudio del medio ambiente no se limitan.
- es de Particular importancia bacteriológico análisis de material biológico en los hospitales. A la investigación que llevan a cabo en hospitales exigencias. El objetivo de la Orden "de la unificación De los métodos microbiológicos de la investigación" es la mejora de las armas bacteriológicas análisis, la mejora de la calidad y la eficacia de la microbiología en el diagnóstico.
Éste es un método de análisis en el diagnóstico de las infecciones de transmisión sexual y enfermedades oportunistas (provenientes de la oportunistas por bacterias).
Microscópico de análisis que permite evaluar la calidad y cantidad de la composición de la microflora, comprobar la validez de la toma de la muestra. Por ejemplo, la presencia del epitelio vaginal en la pincelada, tomado del canal cervical, indica la violación de las reglas de selección de muestra biológica.
Vale la pena decir que microbiológica de la encuesta, en este caso, en general se acompaña de ciertos problemas. Se relacionan con el hecho de que en los departamentos inferiores del aparato reproductivo en la norma la presente diversa de la microflora, la cambiante en diferentes períodos de edad. Para mejorar la eficacia de la investigación y se formularon las reglas unificadas.
Ella se realiza la identificación de arn y el adn de los patógenos. Se basan principalmente en la definición de secuencias de nucleótidos en el material patalgico. Para ello, se utilizan sondas moleculares. Ellos son artificialmente recibidos los ácidos nucleicos, complementarias (complementarias) viral ácidos, marcado con la radiación en la etiqueta o биотином.
Característica del método es repetida copia de fragmentos específicos de adn que incluye varios cientos o decenas de pares de nucleótidos. Mecanismo de replicación (copia de seguridad) es que достраивание puede comenzar exclusivamente en determinados bloques. Para su creación se utilizan cebadores (cebos). Ellos son oligonucleótidos sintetizados.
Pcr-diagnóstico (reacción en cadena de polimerasa) es de fácil ejecución. Este método permite obtener resultados rápidamente cuando se utiliza una pequeña cantidad de material patológico. Mediante pcr-el diagnóstico se identifican agudas, crónicas y latentes (ocultos) de la infección.
Cuando la sensibilidad de este método es mejor. Sin embargo, en la actualidad, el sistema de prueba no es suficiente, por lo tanto, la pcr-el diagnóstico no puede sustituir completamente a las metodologías tradicionales.
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